PCR儀準確的講包括實時熒光定量PCR儀在內(nèi)都沒有自動加樣和標本處理系統(tǒng),只能算半自動的。PCR儀簡單的說包括溫控設備和檢測設備。
一、關于溫控
主要是介質(zhì)問題。理想的介質(zhì)是導熱性好、比熱大、接觸緊密。這方面好的是水浴和油浴,比熱大(油比水更大)、溶劑化物體,與反應物無縫接觸,效果當然好。但是自動化,小型化難,只有初的水浴鍋式使用。
1、硅加熱
這是使用普遍的一種,優(yōu)點:易自動化、速度快、直接加熱降溫,效果當然好,但是*成本較高,第二其使用的介質(zhì)是金屬,導熱雖然好,但是與反應管,很難做到無縫接觸,定性時代可以加油,但用熒光定,由于油有熒光信號不能用。所以在無縫接觸上差一些。第三由于是底部加熱,下部壓力較大,有溢出的可能,不過新的儀器在加熱蓋以后解決了這個問題。
2、空氣加熱
用空氣做介質(zhì)有優(yōu)點,與反應體系無縫接觸,但是空氣的導熱性差、比熱小的弱點明顯。因此空氣加熱的要利用離心來產(chǎn)生空氣流動,增強導熱性,同時使用毛細管,加大接觸面積、試劑微量化來彌補。這樣做了以后效果還是不錯。但有的廠商把什么離心、毛細管的好處大講特講,對氣加熱的弱點閉口不談,卻是高明的市場手法。同時,使用離心,對標本量增大是有影響的并且標本量越大,空氣比熱小的弱點就越明顯,所以空所加熱的儀器標本量都比較小。使用毛細管后由于反應液與管的接觸面積增大,吸附現(xiàn)象更大,因此試劑的通用性差一般要專門開發(fā),成本高,雖然試劑用量少,但因為是試劑,每人份就是以實際量算,并不省試劑。反而增加了毛細管成本。
二、關于功能
所有的PCR儀功能都大體相同。只有MJ孔間能使用不同溫度比較*,這對于多項目同時檢測以及循環(huán)參數(shù)的調(diào)整比較有用。但其實時熒光的儀器剛進入中國不久,具體如何還不得而知。
三、關于選購
根據(jù)單位情況而定,關于進口儀器,
羅氏PCR儀不錯。另外,每個標本要分攤的標準曲線、對照成本太高。同時,試劑也比較受限。