要想很好地應(yīng)用
BD流式細(xì)胞儀分析和分選技術(shù),必需先對(duì)BD流式細(xì)胞儀進(jìn)行調(diào)試,使其處于良好的工作狀態(tài),并能正確使用儀器。下面就來(lái)簡(jiǎn)單介紹下BD流式細(xì)胞儀的調(diào)試:
BD流式細(xì)胞儀在使用前,甚至在使用過(guò)程中都要精心進(jìn)行調(diào)試,以保證工作的可靠性和佳性。調(diào)試的項(xiàng)目主要是激光強(qiáng)度、液流速度和測(cè)量區(qū)的光路等。
1.激光強(qiáng)度:除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長(zhǎng)的激光出光外,還要結(jié)合顯示屏上的光譜曲線使激光的強(qiáng)度輸出為大。
2.液流速度:可通過(guò)操作臺(tái)數(shù)字顯示監(jiān)督,調(diào)節(jié)氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
3.測(cè)量區(qū)光路調(diào)節(jié):這是調(diào)試工作的關(guān)鍵。需要保證在測(cè)量區(qū)的液流、激光束、90散射測(cè)量光電系統(tǒng)垂直正交,而且交點(diǎn)較小。一般可在用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球等校準(zhǔn)中完成。
流式細(xì)胞術(shù)中所測(cè)得的量是相對(duì)值,因此需要在使用前或使用中對(duì)
BD流式細(xì)胞儀系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)或標(biāo)定,這樣才能通過(guò)相對(duì)測(cè)量獲得的意義。
儀器的準(zhǔn)直調(diào)整和定量標(biāo)度。標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)該穩(wěn)定,有形成份形狀應(yīng)是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經(jīng)濟(jì)、容易獲得。常用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球作為非生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品,雞血紅細(xì)胞做為生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品。微球用樹脂材料制作,或標(biāo)有熒光素,或不標(biāo)記熒光素。